Hvala što ste posjetili Nature.com.Verzija preglednika koju koristite ima ograničenu podršku za CSS.Za najbolje iskustvo preporučujemo da koristite ažurirani preglednik (ili onemogućite način kompatibilnosti u Internet Exploreru).U međuvremenu, kako bismo osigurali kontinuiranu podršku, prikazat ćemo stranicu bez stilova i JavaScripta.
Posttraumatski stresni poremećaj (PTSP) karakterizira oštećenje sposobnosti neutraliziranja odgovora straha na znakove povezane s traumom.Studije na ljudima i životinjama ukazuju na razlike u uključenosti određenih područja frontalnog korteksa kao ključnih medijatora koji određuju uspjeh suzbijanja straha, ali međudjelovanje neuronskih krugova koji određuju različitu uključenost tih područja nije jasno.Da bismo bolje razumjeli kako se individualne razlike u prisjećanju izumiranja odražavaju na razlike u aktivnosti neuronskih krugova, označili smo projekcije iz sublimbičkog korteksa štakora (IL) retrogradnim tragačima i usporedili neuronske projekcije unutar i izvan IL projekcijskih neurona.Analizirali smo te podatke, grupirajući ih prema stupnju očuvanosti blijedeće memorije kod štakora.Otkrili smo da su u stanicama koje projiciraju IL neuroni u stražnjem paratalamusu pokazali povećanu aktivnost kod štakora, koji su pokazali dobro sjećanje na izumiranje.Uz stanice koje projiciraju IL, povećana aktivnost Fos uočena je u odabranim područjima klaustruma štakora i ventralnog hipokampusa s dobrom rezolucijom.Naši rezultati pokazuju da su razlike u sjećanju izumiranja povezane sa specifičnim obrascima neuralne aktivnosti unutar i izvan IL projekcija.
Uvjetovanje straha događa se kada je neutralni podražaj povezan s averzivnim bezuvjetnim podražajem (UCS), tako da izvorno neutralni podražaj, sada uvjetovani podražaj (CS), izaziva uvjetovani odgovor straha (CR) u odsutnosti UCS-a.Poništavanje uvjetovanog straha bilo je potaknuto smanjenjem CR-a na CS zbog ponovljene prezentacije CS-a u odsutnosti UCS1.Prethodna istraživanja su pokazala da je posttraumatski stresni poremećaj (PTSP) povezan s nesposobnošću pamćenja nestanka uvjetovanih reakcija straha2.Kamen temeljac kognitivne bihevioralne terapije za liječenje posttraumatskog stresnog poremećaja je terapija izloženosti koja se temelji na gašenju naučenih reakcija na strah3,4.Stoga studije individualnih razlika u strahu od izumiranja glodavaca i neuralnih mehanizama koji leže u pozadini mogu pomoći u razjašnjavanju razlika u ljudskim reakcijama na traumu i liječenje posttraumatskog stresnog poremećaja.Unatoč napretku u identificiranju neuronskih mehanizama koji razlikuju uspješna od neuspješnih sjećanja na izumiranje, još mnogo toga treba otkriti.
Modeli glodavaca korisni su u ovom radu jer postoje značajne individualne razlike u sjećanju na izumiranje glodavaca7,8,9,10.Prethodni rad koji je istraživao neuralne mehanizme izumiranja straha na razini populacije pokazao je da je aktivacija infralibičkog korteksa (IL) potrebna za prisjećanje izumiranja (ref. 11, 12, 13, ali vidi 14), a neke su studije otkrile smanjenje u aktivnost glodavaca u IL pokazujući slabo pamćenje o izumiranju u usporedbi s glodavcima kojih se jako strahuje.Međutim, nejasni su mehanizmi kojima su IL različito uključeni u olakšavanje uklanjanja straha kod glodavaca u usporedbi s onima koji pokazuju slabije izumiranje.
Jedna je mogućnost da su razlike u sjećanju na izumiranje straha među pojedincima rezultat različite aktivacije specifičnih aferentnih IL-ova.Anatomske studije18 pokazale su da različita kortikalna i subkortikalna područja mozga šalju guste projekcije u IL, koji zauzvrat šalje eferentne projekcije u mnoga područja mozga.Studije na razini populacije pokazale su da su projekcije IL-a na amigdalu važne za stjecanje izumiranja straha20,21,22, a unos IL-a iz bazolateralne amigdale (BLA) također je povezan s učenjem izumiranja.Postoji manje istraživanja o uključenosti krugova usmjerenih na IL u prisjećanju izumiranja, iako nedavni radovi sugeriraju da su i ventralni i dorzalni hipokampus uključeni u predviđanje IL.Eferentne projekcije IL-a na rekombinirajuću jezgru talamusa, očito, također sudjeluju u sjećanju na izumiranje straha.
Ove prethodne studije počinju davati sliku interakcije neuronskih krugova uključenih u prisjećanje izumiranja, ali postoji vrlo malo podataka o tome utječe li aktivnost u neuralnim krugovima usmjerenim na IL na individualne razlike u prisjećanju izumiranja.Ovdje smo nastojali utvrditi jesu li razlike u pamćenju izumiranja straha među pojedincima povezane s promjenama u aktivaciji inputa IL u određenim regijama mozga.Konkretno, procijenili smo aktivaciju IL aferentnih stanica u paraventrikularnoj jezgri talamusa (PVT), klavikuli (CLA), BLA i ventralnom hipokampusu (vHPC).Ove regije mozga su odabrane i zato što šalju guste projekcije u IL i zato što postoji razlog za sumnju da bi mogle biti uključene u izražavanje izumiranja straha 18 .Na primjer, nedavna studija pokazala je da je PVT, regija za koju se zna da je uključena u stjecanje i reprodukciju straha, potrebna za reprodukciju izumiranja.Osim toga, prethodne studije su pokazale povećanu bazalnu aktivnost amigdale i vHPC kod štakora koji izražavaju sjećanje na izumiranje.Konačno, analiza klaustruma više je istraživačka s obzirom na to da niti jedan prethodni rad nije procijenio njegovu ulogu u izumiranju.Međutim, noviji radovi sugeriraju da on igra ulogu u kontekstualnom uvjetovanju straha29.
Virusni GFP-konjugirani retrogradni tragovi ubrizgani su u IL štakora prije bihevioralnog testiranja, a aktivnost Fos u IL aferentima je mjerena tijekom reprodukcije izumiranja, prisjećanja straha i kod štakora koji nisu bili podvrgnuti bihevioralnom testiranju.Naši rezultati pokazuju da projekcije sa stražnjeg paraventrikularnog talamusa na IL pokazuju povećanu aktivnost kod štakora koji se uspješno prisjećaju izumiranja.Uz IL predviđanja, neuralna aktivnost u određenim područjima ključne kosti i ventralnog hipokampusa bila je povećana kod štakora koji su se dobro povukli.Naši rezultati pokazuju da su obrasci intrinzične i ekstrinzične neuralne aktivnosti projicirani na IL povezani s individualnim razlikama u pamćenju izumiranja straha.
Pedeset i četiri odrasla muška Sprague-Dawley štakora (300-325 g po dolasku) dobivena iz Charles River Laboratories (Raleigh, NC) korištena su kao subjekti.Štakori su bili smješteni u parovima, sa slobodnim pristupom hrani i vodi, u 12-satnom ciklusu svjetlo/tama (svjetlo se pali u 7 ujutro).Za ove pokuse korištene su dvije skupine štakora (n = 28 i n = 26).Nakon isključenja smrti, kirurške pogreške, nedostatka ekspresije GFP-a na ciljanom mjestu, loše kvalitete tkiva i problema u ponašanju (objašnjenih u Metodama), skupina za prisjećanje izumiranja uključivala je 21 štakora, a skupina za prisjećanje straha uključivala je 7 štakora, kućnih kaveza.skupina se sastojala od 7 štakora (35 štakora je uključeno u konačnu analizu).Sve postupke odobrio je Odbor za institucionalnu skrb i korištenje životinja Sveučilišta Stony Brook i bili su u skladu sa smjernicama ARRIVE (https://arriveguidelines.org) i smjernicama NIH-a za skrb i korištenje laboratorijskih životinja.
Štakori su tretirani dva dana prije operacije.Štakori su anestezirani ketaminom (87 mg/kg) i ksilazinom (10 mg/kg), stavljeni u stereotaksički aparat (Stoelting, Woodale, IL) i primili su jednostrane injekcije AAVrg-CAG-GFP (Addgene, 30) u IL.(uravnotežite lijevu i desnu injekciju).Za ubrizgavanje, kanila promjera 22 spuštena je na mjesto (AP: + 3,00, ML: ± 0,6, DV: – 5,2).Umetnite 28G unutarnju kanilu (spojenu na infuzijsku pumpu putem PE 20 cijevi) u kanilu vodilicu za isporuku 0,6 µl virusa brzinom od 0,15 µl po minuti i ostavite na mjestu 5 minuta nakon što je infuzija netaknuta..Nakon šivanja, štakorima je ubrizgan meloksikam (1 mg/kg) i čim su se mogli kretati, vraćeni su u svoje kaveze.Štakori su držani u svojim kavezima oko 7 tjedana kako bi se omogućio oporavak virusa i retrogradni transport.Tri štakora su umrla pod anestezijom, što je rezultiralo time da se 51 štakor (94%) uspješno oporavio od operacije.
Svi postupci su izvedeni u komorama za kondicioniranje dimenzija 32 cm × 25 cm × 21 cm (Clever Systems Inc., Reston, VA) smještenim u izolacijskim kutijama za upijanje zvuka dimenzija 45,7 cm × 43,2 cm × 43,2 cm (Clever Sys. . Inc.).).Tijekom sesija učenja o izumiranju i prisjećanja na izumiranje, kontekst je promijenjen kako bi se razlikovao od izvornog uvjetnog konteksta.Uvjet A (generiranje straha) uključivao je 28-voltne žarulje sa žarnom niti za kućanstvo (Chicago Micro Lighting, UK), dok je uvjet B (obuka gašenja, test prisjećanja izumiranja i test prisjećanja straha) uključivao infracrvene LED svjetiljke (Univivi IR Illuminator, Shenzhen) ., Kina;U48R).Osim toga, dok Context A ima antivibracijski rešetkasti pod sa stijenkama od nehrđajućeg čelika i pleksiglasa, Context B sadrži obojene metalne umetke postavljene na podu i zidovima.Oblik Context B također je modificiran postavljanjem zakrivljenog metalnog umetka dimenzija 33,5 cm x 21,3 cm u standardnu ​​komoru za kondicioniranje.Osim toga, u kontekstu A komore su obrisane s 5% octenom kiselinom, dok su u kontekstu B komore obrisane s 5% amonijevim hidroksidom.Konačno, u kontekstu B, štakori su dovedeni u prostoriju za testiranje u kantama umjesto da se kotrljaju u kavezima na kolicima.Sesije ponašanja snimljene su gornjom kamerom, a video signal sa svake kamere uveden je u softver (FreezeScan 2.00, Clever Sys. Inc., Reston, VA) koji je procijenio ponašanje blijeđenja na temelju promjena piksela.Parametri su odabrani tako da ponašanje fedinga koje je procijenilo računalo blisko odgovara ponašanju uvježbanih promatrača procijenjenom ručno.Vrijednost koja pokazuje postotak vremena zamrzavanja smotanog u intervalu od 30 sekundi.
Svi programi ponašanja izvode se tijekom svijetlog dijela ciklusa svjetlo/tama.Štakori su tretirani 5 dana prije početka bihevioralnih postupaka i transportirani u bihevioralnu sobu za zadnja tri dana tretmana.Prvog dana testiranja ponašanja, skupina štakora koji su se prisjećali izumiranja stavljena je u refleks uvjetovani strahom, zatim stavljena u kontekst A, dano im je 6 minuta nestimuliranog razdoblja aklimatizacije, a zatim su im dane obje kombinacije od 4 kHz, 76 dB, 30 s .ton i ukupni prekid, 1,0 mA, udarac 1 s (2 min ITI).Za sve bihevioralne treninge, štakori su vraćeni u kaveze 2 minute nakon zadnje prezentacije podražaja.Sljedećeg dana, štakori iz grupe koja je opozivala izumiranje stavljeni su u prostoriju B i izveli su 20 zvučnih prezentacija (2 min ITI) kao trening izumiranja nakon 6 minuta navikavanja.Sljedeći dan, štakori u skupini reprodukcije izumiranja bili su izloženi 4 tona u kontekstu B nakon 6-minutnog perioda aklimatizacije kao test izumiranja.Štakori u skupini pamćenja izumiranja dobili su perfuziju 60 minuta nakon bihevioralne sesije.Grupa kontrolnih štakora koji su evocirali sjećanja na strah podvrgnuta je istoj proceduri prvog dana reakcije uvjetovane strahom u kontekstu A. Četrdeset osam sati kasnije, štakori su stavljeni u kontekstnu sobu B i podvrgnuti 4 audio prezentacije (2- minuta ITI) kao test prisjećanja.strah nakon 6-minutnog perioda aklimatizacije.Štakori su perfundirani 60 minuta nakon bihevioralne sesije.Grupa domaćih kontrolnih štakora ostala je u svojim kućnim kavezima tijekom cijelog eksperimenta i dobili su perfuziju istog dana kada i pokusni štakori.Svaka od dvije skupine štakora podijeljena je u dvije serije, a broj životinja u svakoj skupini bio je uravnotežen između serija.Jedan štakor u skupini sjećanja na strah bio je isključen iz analize jer nije pokazivao znakove uvjetovanja strahom (smrzavanje manje od 15% vremena tijekom testa sjećanja na strah).Pogledajte sliku 2A za dijagram vremenske linije ponašanja.
Štakori su bili predozirani otopinom Fatal Plus (100 mg/kg), zatim perfundirani s ledeno hladnim 10% PBS-om nakon čega je slijedio 10% puferirani formalin.Mozak je uklonjen i pohranjen u 30% otopini saharoze u formalinu na 4°C oko 1 tjedan.Zatim je mozak zamrznut i izrezan u kriostat debljine 40 µm.Sekcije su pohranjene uzastopno u 10% PBS na 4°C.Zatim je izvedena imunofluorescencija na slobodno plutajućim dijelovima koji sadrže područje mozga od interesa.Sekcije su isprane 3 puta u 10% PBS-u po 5 minuta svaka.Sekcije su zatim inkubirane u 5% otopini za blokiranje normalnog kozjeg seruma 2 sata na sobnoj temperaturi, a zatim su isprane još tri puta po 5 minuta u 10% PBS.Sekcije su zatim inkubirane preko noći na 4°C u primarnim antitijelima (c-Fos, #2250, 1:500) (Cell Signaling, Danvers, MA) razrijeđenim u 1% BSA u 10% PBS.Sljedeći dan, rezovi su isprani u 10% PBS-u 30 minuta na 4°C, zatim 3 puta po 5 minuta u 10% PBS-u i inkubirani sa sekundarnim antitijelom (Alexa Fluor 594 kozji anti-zečji, crveni konjugat, 1:500 ).) (Invitrogen, Carlsbad, CA) na sobnoj temperaturi 2 sata.Nakon 3 dodatna ispiranja u 10% PBS-u tijekom 5 minuta, rezovi su stavljeni na stakalce i zapečaćeni s Fluoromount-G (Invitrogen).Pogledajte reprezentativne slike imunološkog bojenja na slici 3G.
Fluorescentni mikroskop koji koristi digitalnu kameru Infinity3 (Lumenera, Ottawa, Ontario, Kanada) i svjetlosni mehanizam (Lumencor, Beaverton, OR) spojen na Zeiss mikroskop korišten je za dobivanje slika iz svake regije mozga od interesa, uključujući dijelove koji sadrže IL bez imunofluorescencije.kako bi se potvrdio točan položaj mjesta ubrizgavanja.Slike korištene za brojanje stanica dobivene su pri povećanju od 20x.Za svaki presjek tkiva snimite jednu sliku s filtrom koji omogućuje vizualizaciju GFP-a i jednu sliku s filtrom koji omogućuje vizualizaciju Alexa Fluor crvenog konjugata u sekundarnom protutijelu, a za sliku je korišten softver za snimanje (Infinity Analyze, verzija 3). preklapanje.Snimite sve slike svih područja mozga koristeći isto vrijeme ekspozicije i postavke pojačanja.Šest štakora isključeno je iz analize jer se glavni prijenos virusa dogodio izvan IL-a (stopa pogodaka 88%).Još osam štakora je isključeno jer, unatoč tome što je virus napadao IL, nisu pokazali dovoljnu ekspresiju GFP-a u svim ciljanim regijama mozga od interesa.Osim toga, jedan je štakor bio isključen zbog loše kvalitete tkiva.
Podesite svjetlinu i kontrast kako biste smanjili pozadinsku buku na slici J (NIH) koristeći isti postupak za svaku sliku.Brojanje stanica za ukupne retrogradno obilježene stanice, ukupne Fos-označene stanice i ukupne dvostruko obilježene stanice izvršio je ručno eksperimentator, koji nije identificirao životinje, koristeći dodatak za citometar Image J.Broj stanica je normaliziran na stanice/mm2.Za analizu ekspresije Fos u stanicama koje projiciraju IL, broj dvostruko obilježenih stanica normaliziran je na ukupan broj retrogradno obilježenih stanica.Za mBLA, mvHPC i pvHPC analizu, broj stanica iz više 20x slika je zbrojen i normaliziran na stanice/mm2.Za analizu ostalih regija mozga, slika 20x ili dio slike 20x analizirana je i normalizirana na stanice/mm2.Analiza vHPC-a uključivala je CA1, CA2 i subdominantne vHPC regije.Slika 1 prikazuje regije mozga analizirane slikama koje ocrtavaju anteriorno-posteriornu granicu ravnine.
Kratice i položaj područja mozga od interesa.Objašnjenje kratica i položaja moždanih regija danih u rukopisu.Karta mozga u javnoj domeni preuzeta od Swanson (2004.) Mapa mozga: Struktura mozga štakora, 3. izdanje, licencirano pod međunarodnom licencom Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc/ 4.0) ./), dostupan za preuzimanje na https://larrywswanson.com.
Postotak vremena zamrzavanja je prosječan tijekom razdoblja reprodukcije tona od 30 sekundi, isključujući međuintervale.Stope prisjećanja gašenja izračunate su izražavanjem postotka vremena iščezavanja tijekom prisjećanja gašenja kao postotka iščezavanja tijekom prva 4 pokušaja uvježbavanja gašenja (blijeđenje tijekom četiri tona prisjećanja gašenja/blijeđenje tijekom prva četiri tona uvježbavanja gašenja*100).Niski rezultati ukazuju na dobro pamćenje izbljeđivanja, a visoki rezultati ukazuju na loše pamćenje izbljeđivanja.Štakori su razvrstani prema rezultatu prisjećanja izumiranja, pri čemu su štakori u gornjoj trećini rezultata prisjećanja izumiranja klasificirani kao "loši štakori izumiranja", a štakori u posljednje dvije trećine rezultata prisjećanja izumiranja klasificirani su kao "dobri".Štakori koji blijede u pamćenju.
Neparametrijski testovi se koriste jer podaci često krše pretpostavke o normalnoj distribuciji i/ili homogenosti varijanci.Spearmanova korelacija ranga korištena je da se utvrdi postoji li značajna povezanost između rezultata prisjećanja izumiranja i Fos markera i dvostrukih markera u regijama mozga od interesa kod svih štakora podvrgnutih testu prisjećanja izumiranja.Mann-Whitney U-test je korišten kako bi se utvrdilo postoji li razlika između dvije neovisne skupine.Kruskal-Wallisov test koristi se za određivanje razlikuju li se 2 ili više grupa jedna od druge, a Dunnov test višestruke usporedbe koristi se kada je Kruskal-Wallisova statistika značajna.Zamiranje tijekom učenja nakon izumiranja procijenjeno je korištenjem ponovljenih mjerenja analize varijance s grupom kao inter-predmetnim faktorom i testom kao unutar-predmetnim faktorom. Rezultati su se smatrali značajnima kada je p < 0,05 za sve statističke testove. Rezultati su se smatrali značajnima kada je p < 0,05 za sve statističke testove. Rezultati su smatrani značajnim pri p < 0,05 za sve statističke testove. Rezultati su smatrani značajnim pri p < 0,05 za sve statističke testove.当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。当所有统计检验的p < 0,05 时，结果被认为是显着的。 Rezultati su smatrani značajnim pri p < 0,05 za sve statističke testove. Rezultati su smatrani značajnim pri p < 0,05 za sve statističke testove.
Slika 2 prikazuje vremenski okvir eksperimenta (Slika 2A) i distribuciju učestalosti svih štakora koji su bili podvrgnuti izumiranju (Slika 2B). Štakori u skupinama s dobrim i lošim izumiranjem značajno su se razlikovali u ovim izračunatim rezultatima prisjećanja izumiranja (U = 0, p < 0,001) (Slika 2C). Štakori u skupinama s dobrim i lošim izumiranjem značajno su se razlikovali u ovim izračunatim rezultatima prisjećanja izumiranja (U = 0, p < 0,001) (Slika 2C). Krise u grupama s dobrim i lošim ugašenjima znatno su se razlikovale po ovim ispitanim pokazateljima pripominjanja ugašenja (U = 0, p <0,001) (ris. 2C). Štakori u skupinama s dobrim i lošim izumiranjem značajno su se razlikovali u ovim izračunatim stopama prisjećanja izumiranja (U=0, p<0,001) (Slika 2C).在这些计算的灭绝回忆分数中，良好和不良灭绝组中的大鼠存在显着差异＂ (U = 0，p <0,001）（图). 2C). U = 0， p <0,001） (图2C， U ovim rassčitanim pokazateljima pripominjanja ugašenosti krisa u grupama s dobrim i lošim ugašenjima znatno su se razlikovale (U = 0, p <0,001) (ris. 2C). U ovim izračunatim stopama prisjećanja izumiranja, štakori u skupinama s dobrim i lošim izumiranjem značajno su se razlikovali (U = 0, p < 0,001) (Slika 2C).Nije bilo značajne razlike u vremenu smrzavanja između skupina s dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem i prisjećanjem straha tijekom osnovnog razdoblja sesije uvjetovanog refleksa strahom (X2(2) = 2,746, p = 0,253) (Slika 2D).Osim toga, tijekom ispoljavanja prvog tona uvjetovanog refleksa straha, nije bilo značajne razlike u vremenu smrzavanja između skupina s dobrom ekstincijom, lošom ekstincijom i prisjećanjem straha (X2(2) = 1,107, p = 0,575), jer kao i tijekom straha tijekom drugih tonova.Tijekom sesije kondicioniranja, postojala je značajna razlika u vremenu smrzavanja između skupina s dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem i prisjećanjem straha (X2(2) = 2,214, p = 0,331) (Slika 2D).Također nije bilo značajne razlike u vremenu iščezavanja između grupa s dobrim i slabim izumiranjem tijekom osnovnog razdoblja obučavanja izumiranja (U = 45,00, p = 0,799) (Slika 2D). Zatim je postojao značajan glavni učinak probnog bloka (5 tonova po bloku) na vrijeme provedeno u smrzavanju tijekom sesije obučavanja izumiranja (F (2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), što ukazuje da je došlo do učenja izumiranja (Slika 2D). ). Zatim je postojao značajan glavni učinak probnog bloka (5 tonova po bloku) na vrijeme provedeno u smrzavanju tijekom sesije obučavanja izumiranja (F (2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), što ukazuje da je došlo do učenja izumiranja (Slika 2D). ). Zatim je promatran značajan osnovni učinak probnog bloka (5 tona po bloku) u vrijeme, traženo na zamiranje u vrijeme treninga ugašanja (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), što ukazuje na to da je obuka ugašenju proizašla ( ris. 2D). Tada je postojao značajan glavni učinak probnog bloka (5 tona po bloku) na vrijeme potrebno za zamrzavanje tijekom treninga ekstinkcije (F(2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), što ukazuje da se odvijalo učenje ekstinkcije (Slika 2D). ).接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主效应（F（2,884，54,80）=8,3 31，p < 0,001），表明发生了消退学习（图2D） ） .接下来，在消退训练期间，试块（每块5 音）对冻结时间有显着的主效应（F（2,884，54,80）=8,3 31，p < 0,001），表明发生了消退学习（图2D） ） . Zatim, u vrijeme obučavanja ugašenosti, probni blokovi (5 tona po bloku) pokazali su značajan osnovni utjecaj na vrijeme zamiranja (F (2,884, 54,80) = 8,331, p <0,001), što ukazuje na to da je obuka ugašena proizašla (ris 2D). Zatim, tijekom učenja ekstinkcije, probni blokovi (5 tonova po bloku) imali su značajan glavni učinak na vrijeme slabljenja (F(2,884, 54,80) = 8,331, p < 0,001), što ukazuje da se odvija učenje ekstinkcije (Sl. .2D) .Međutim, grupa za izumiranje (F(1, 19) = 3,091, p = 0,095) nije imala značajan učinak na vrijeme iščezavanja tijekom cijelog perioda treninga za izumiranje i nije bilo interakcije između probnog bloka i skupine za izumiranje (F(4 , 19)).76) = 1,890, p = 0,121) (Slika 2D). Tijekom sesije testiranja, postojala je značajna razlika između skupina s dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem i prisjećanjem straha u vremenu provedenom u smrzavanju tijekom početnog razdoblja (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) tako da se skupina prisjećanja straha značajno smrzavala više od skupine s dobrim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 10,57, p = 0,017), ali ne i s lošom skupinom s izumiranjem (srednja razlika u rangu = − 3,714, p > 0,999) (Sl. 2D). Tijekom sesije testiranja, postojala je značajna razlika između skupina s dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem i prisjećanjem straha u vremenu provedenom u smrzavanju tijekom početnog razdoblja (X2 (2) = 8,569, p = 0,014) tako da se skupina prisjećanja straha značajno smrzavala više od skupine s dobrim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 10,57, p = 0,017), ali ne i s lošom skupinom s izumiranjem (srednja razlika u rangu = − 3,714, p > 0,999) (Sl. 2D).Tijekom sesije testiranja, postojala je značajna razlika između skupina s dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem i prisjećanjem straha u vremenu provedenom u smrzavanju tijekom početnog razdoblja (X2(2) = 8,569, p = 0,014), tako da se skupina prisjećanja straha zamrznula značajno .više, nego u grupi dobrih rezultata (srednja klasa rangova = 10,57, p = 0,017), ali ne u grupi loših rezultata (srednja klasa rangova = -3,714, p> 0,999) (slika 2D). veća nego u skupini s dobrim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 10,57, p = 0,017), ali ne i u skupini s lošim izumiranjem (srednja razlika u rangu = −3,714, p > 0,999) (Slika 2D).在测试期间，良好消退组、不良消退组和恐惧回忆组在基线期冻结时间方面存在显着差异(X2) (2) = 8,569，p = 0,014，因此恐惧回忆组冻结显着超过良好的灭绝组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差的灭绝组＄(平均秩差= – 3,714，p > 0,999）（图2D）).在 测试 期间 ， 良好 消退组 、 消 退组 和 恐惧 在 基线期 冻结 时间 方面 存在 显着 差异（（x2 (2) = 8,569 ， p = 0,014） 恐惧 回忆组 冻结 显着 良好 的 组 组 组 组 组组 组 组（平均秩差= 10,57，p = 0,017），但不是差绝组，(平均秩差= – 3,714，p > 0,999）（图2D）). Tijekom razdoblja testiranja uočena je značajna razlika između grupe s dobrim ugašenjem, grupe s lošim ugašenjem i grupe s prisjećanjem straha s točke gledišta vremena zamiranja na ishodnoj razini (X2 (2) = 8,569, p = 0,014), stoga prisjećanje straha grupe zamjera znatno više , što je grupa s dobrim rezultatom (srednja klasa rangova = 10,57, p = 0,017), ali ne grupa s lošim rezultatom (srednja klasa rangova = -3,714, p> 0,999) (slika 2D). Tijekom razdoblja testiranja, postojala je značajna razlika između skupine s dobrim izumiranjem, skupine s lošim izumiranjem i skupine s prisjećanjem straha u smislu vremena smrzavanja na početku (X2(2) = 8,569, p = 0,014), tako da je prisjećanje straha skupina smrzava znatno češće od skupine s dobrim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 10,57, p = 0,017), ali ne i skupina s lošim izumiranjem (srednja razlika u rangu = -3,714, p > 0,999) (Slika 2D).Skupina s dobrim izumiranjem, skupina s lošim izumiranjem i skupina s prisjećanjem straha također su imale značajno različita vremena iščezavanja tijekom prezentacije tona testne sesije (X2(2) = 14,93, p = 0,001), tako da je skupina s dobrim izumiranjem imala značajno manje vrijeme.vrijeme smrzavanja nego u skupini sa slabim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 9,286, p = 0,044) i skupini s pamćenjem straha (srednja razlika u rangu = 13,86, p = 0,001) (Sl. 2D).
Individualne razlike u sjećanju na izumiranje.(A) Pregled kirurških i bihevioralnih postupaka.(B) Distribucija učestalosti koja pokazuje individualne razlike u rezultatima nestajanja pamćenja.(C) Dokazi da skupine dizajnirane na temelju izračunatih rezultata prisjećanja izumiranja predstavljaju dva različita fenotipa.(D) Srednji postotak vremena u kojem se štakori smrzavaju zbog lošeg izumiranja, dobrog izumiranja i prisjećanja straha u stanicama od 30 sekundi sesije uvjetovanog refleksa straha, u tonovima 20, 30 s, sažeti u 5 blokova tijekom sesije učenja izumiranja (4 tona) .svaki), te u četiri tona u seansama sjećanja na blijeđenje i sjećanja na strah.Trake pogrešaka predstavljaju standardnu ​​devijaciju srednje vrijednosti. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *r < 0,05, **r < 0,01, ***r < 0,001, ****r < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001. *p < 0,05，**p <0,01，***p <0,001，****p <0,0001。 *p < 0,05，**p <0,01，***p <0,001，****p <0,0001。 *r < 0,05, **r < 0,01, ***r < 0,001, ****r < 0,0001. *p < 0,05, **p < 0,01, ***p < 0,001, ****p < 0,0001.
Retrogradni indikator ubrizgan je u IL (Slika 3A) i određen je broj GFP+ stanica duž anteriorno-posteriorne osi interesne regije (Slika 3B-F).Postojala je značajna razlika u broju GFP+ stanica između prednje, srednje i stražnje PVT (X2(2) = 8,200, p = 0,017), tako da je mPVT pokazao značajno više GFP+ stanica nego aPVT (srednji rang) Diff.= 18,37, p = 0,035) i pPVT (srednja razlika ranga = 17,71, p = 0,045) (slika 3C).Iako nekoliko životinja nije otkrilo nikakve GFP+ stanice u pCLA i stoga nisu mogle mapirati aktivnost u ovoj regiji, nije bilo značajne razlike između prednjeg, srednjeg i stražnjeg CLA (X2(2) = 5,596, p = 0,061).Broj GFP+ ćelija (Slika 3D).Zatim, budući da su neke GFP+ stanice pronađene u aBLA ili avHPC u nekoliko štakora, analizirani su samo srednji i stražnji dio tih područja.Srednji i stražnji BLA (U=393, p=0,009) značajno su se razlikovali u broju GFP+ stanica, tako da je pBLA pokazala više IL projekcija nego mBLA (Slika 3E).Slično tome, postojala je značajna razlika između srednjeg i stražnjeg vHPC-a, tako da su pvHPC-i pokazali više IL projekcija od mvHPC-a (U = 403,5, p = 0,014) (Slika 3F).Slika 3G je primjerna slika koja prikazuje Fos, aavRG-GFP i dvostruko označene stanice.
Kvantificirajte IL aferente u čitavom području mozga od interesa.(A) Shematski prikaz distribucije aavRG-CAG-GFP u IL cijelog štakora.(B) Reprezentativne slike retrogradnih markera na različitim anteroposteriornim mjestima u regiji mozga od interesa.Kvantifikacija retrogradnog označavanja duž anteroposteriorne osi (C) paraventrikularnog talamusa, (D) ključne kosti, (E) bazolateralne tonzile i (F) ventralnog hipokampusa.(G) Reprezentativne slike koje prikazuju retrogradno aavRG označavanje, Fos označavanje i dvostruko aavRG i Fos označavanje u aPVT.Trake pogrešaka predstavljaju standardnu ​​devijaciju srednje vrijednosti. *p < 0,05, ** p < 0,01. *p < 0,05, ** p < 0,01. *r < 0,05, **r < 0,01. *p < 0,05, ** p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *r < 0,05, **r < 0,01. *p < 0,05, ** p < 0,01.Mjerna traka 100 µm.Karta mozga u javnoj domeni na ploči A reproducirana je iz Swanson (2004.) Brain Map: Rat Brain Structure, 3rd Edition, licencirano pod međunarodnom licencom Creative Commons Attribution-NonCommons 4.0 (https://creativecommons.org/licenses/by-nc )./4.0/) dostupan za preuzimanje na https://larrywswanson.com.
Fos aktivnost specifična za globalnu i IL projekciju analizirana je u aPVT, mPVT i pPVT kod svih štakora.Nije bilo značajne razlike između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i kućnih stanica u ekspresiji Fos u aPVT (X2(3) = 3,888, p = 0,274) (Slika 4A), niti je postojala značajna korelacija između Fos u aPVT između ekspresije i prisjećanja ekstinkcije (rs = 0,092, p = 0,691) (Slika 4B) ili između ekspresije Fos u aferentima aPVT IL i prisjećanja ekstinkcije (rs = 0,143, p = 0,537) (Slika 4D).Međutim, u aPVT IL aferentima, ekspresija Fos značajno se razlikovala između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i kućnih stanica (X2(3) = 15,05, p = 0,002), tako da je skupina prisjećanja straha pokazala relativno dobro izumiranje.regresijska (srednja razlika u rangu = 11,54, p = 0,003), loša regresija (srednja razlika u rangu = 10,57, p = 0,034) i matična stanica (srednja razlika u rangu = 12,79, p = 0,005) skupine (slika 4C).Nadalje, nije bilo značajne razlike između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i kućnih stanica za ekspresiju Fos u mPVT (X2(3) = 2,272, p = 0,518) (Slika 4E) i za ekspresiju Fos u mPVT..Značajna korelacija s sjećanjem na izumiranje (rs = 0,168 p = 0,468) (Slika 4F).Iako je postojala značajna razlika između dobrih, loših, prisjećanja straha i kućnih stanica u ekspresiji Fos u IL aferentnim mPVT stanicama (X2(3) = 9,252, p = 0,026), post hoc usporedba nije otkrila nijednu ili dvije.Značajne razlike između skupina (Slika 4G).Nadalje, nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u IL-aferentnim mPVT stanicama i sjećanja na izumiranje (rs = 0,174, p = 0,450) (Slika 4H). Zatim, postojala je značajna razlika između skupina s dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem, prisjećanjem straha i kućnim kavezom u ekspresiji Fos u pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), tako da je skupina s dobrim izumiranjem (prosječni rang Diff. = 14,96, p = 0,010), ali ne i grupa slabijeg izumiranja (Mean Rank Diff. = 12,86, p = 0,113) ili grupa prisjećanja straha (Mean Rank Diff. = 2,571, p > 0,999), koja je pokazala više Fos izraza skupina kućnih kaveza (slika 4I). Zatim, postojala je značajna razlika između skupina s dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem, prisjećanjem straha i kućnim kavezom u ekspresiji Fos u pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), tako da je skupina s dobrim izumiranjem (prosječni rang Diff. = 14,96, p = 0,010), ali ne i grupa slabijeg izumiranja (Mean Rank Diff. = 12,86, p = 0,113) ili grupa prisjećanja straha (Mean Rank Diff. = 2,571, p > 0,999), koja je pokazala više Fos izraza skupina kućnih kaveza (slika 4I). Dalje, vidjela se značajna razlika među grupama s dobrim ugašanjima, lošim ugašanjima, ocjenom straha i kućne kletke u ekspresiji Fos u pPVT (X2 (3) = 13,89, p = 0,003), kao i grupa s dobrim ugašanjima (srednji rang Diff. = 14,96, p = 0,010), no ne u skupini loših učinaka (srednja rangna razlika = 12,86, p = 0,113) ili grupi uspominjanja straha (srednja rangna skupina = 2,571, p > 0,999), pokazalo se više izražena ekspresija Fos, koja se nalazi u skupini kućnih stanica (ris. 4I). Nadalje, postojala je značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i kućnih stanica u ekspresiji Fos u pPVT (X2(3)=13,89, p=0,003), tako da je dobra skupina izumiranja (srednji rang Diff. = 14,96, p = 0,010), ali ne u skupini s lošim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 12,86, p = 0,113) ili skupini s pamćenjem straha (srednja razlika u rangu = 2,571, p > 0,999), pokazala je izraženiju ekspresiju Fos nego u skupinu kućnih stanica (Slika 4I).其次 ， ppvt 中 fos 表达 好 消 、 差消 、 恐惧 和 家笼组 之间 存在 显着 差异 （x2 （3） = 13,89 ， p = 0,003） 使得 消组 （（srednja razlika ranga.= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Prosječna razlika u rangu = 12,86, p = 0,113) 或恐惧回忆组(Prosječna razlika u rangu = 2,571, p > 0,999)，比家庭笼组（图4I ),.= 14,96, p = 0,010)，但不是较差的消退(Prosječna razlika u rangu = 12,86, p = 0,113)).Drugo, postojale su značajne razlike u ekspresiji Fos u pPVT između dobrih, loših, prisjećanja straha i kućnih stanica (X2(3) = 13,89, p = 0,003), što čini skupinu dobrog unosa (srednja razlika u rangu = 14,96)., p = 0,010), ali nije niža po ugašenju (srednja klasa rangova = 12,86, p = 0,113) ili skupine ocjena straha (srednja klasa rangova = 2,571, p > 0,999), nego u grupi kućnih ćelija (slika 4I) . , p = 0,010), ali nije lošiji u skupini izumiranja (srednja razlika u rangu = 12,86, p = 0,113) ili skupini prisjećanja straha (srednja razlika u rangu = 2,571, p > 0,999) od skupine kućnih stanica (Slika 4I)..Međutim, nije bilo značajne korelacije između ekspresije pPVT Fos i sjećanja na izumiranje (rs = 0,051, p = 0,825) (Slika 4J).Konačno, postojala je značajna razlika u ekspresiji Fos u aferentima pPVT IL između skupina s dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem, sjećanjima na strah i u kućnim stanicama (X2(3) = 12,34 p = 0,006), tako da je dobar izraz Fos u IL- lošiji nego u skupinama za izumiranje (srednja razlika u rangu = 12,54, p = 0,014) iu matičnoj stanici (srednja razlika u rangu = 12,89, p = 0,049) (Slika 4K) i značajno korelirao s IL aferentima unutar pPVT-a Između aktivacije i opozivom ekstinkcije, bolje prisjećanje ekstinkcije bilo je povezano s većom aktivacijom ovih IL aferenata (rs = -0,438, p = 0,047) (Slika 4L).
Fos aktivnost je bila povećana u IL aferentima stražnjeg paraventrikularnog talamusa (PVT) kod štakora, koji su pokazali dobru regresiju.(A) Nije bilo značajnih razlika između skupina u ekspresiji Fos u aPVT.(B) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i sjećanja na izumiranje u aPVT.(C) Grupa koja se prisjeća straha pokazala je povećanu ekspresiju Fos u IL aferentima u usporedbi sa svim drugim grupama.(D) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u IL aferentima i sjećanja na izumiranje u aPVT.(E) Nije bilo značajnih međugrupnih razlika u ekspresiji Fos kod mPVT.(F) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i sjećanja na izumiranje kod mPVT.(G) Fos ekspresija u aferentnim IL stanicama u mPVT nije se značajno razlikovala između skupina.(H) Nije bilo značajne korelacije između Fos ekspresije u IL aferentima i sjećanja na izumiranje u mPVT.(I) Dobro izumrla skupina, ali nijedna druga skupina, pokazala je povećanu aktivnost Fos u pPVT u usporedbi sa grupom u kućnom kavezu.(J) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i sjećanja na izumiranje u pPVT.(K) Skupina s dobrim izumiranjem pokazala je povećanu ekspresiju Fos u aferentnim stanicama IL u usporedbi sa grupom sa slabim izumiranjem i grupom matičnih stanica.(L) Postoji značajna korelacija između ekspresije Fos u IL aferentima i prisjećanja ekstinkcije, tako da je dobro prisjećanje ekstinkcije povezano s većom ekspresijom Fos u aferentama IL.Trake pogrešaka predstavljaju standardnu ​​devijaciju srednje vrijednosti. *p < 0,05, ** p < 0,01. *p < 0,05, ** p < 0,01. *r < 0,05, **r < 0,01. *p < 0,05, ** p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *p < 0,05, **p < 0,01. *r < 0,05, **r < 0,01. *p < 0,05, ** p < 0,01.
Globalna i IL projekcija specifična Fos aktivnost u aCLA i mCLA štakora je zatim analizirana u svim skupinama. Postojala je značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i kućnog kaveza u ekspresiji Fos u aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036) tako da je skupina prisjećanja straha (srednja razlika ranga = 14,50, p = 0,049), ali ni siromašne (Mean Rank Diff. = 10,21, p = 0,373) ni grupe s dobrim izumiranjem (Mean Rank Diff. = 4,607, p > 0,999) nisu pokazale više Fos ekspresije nego skupina u kućnom kavezu ( Slika 5A). Postojala je značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i kućnog kaveza u ekspresiji Fos u aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036) tako da je skupina prisjećanja straha (srednja razlika ranga = 14,50, p = 0,049), ali ni siromašne (Mean Rank Diff. = 10,21, p = 0,373) ni grupe s dobrim izumiranjem (Mean Rank Diff. = 4,607, p > 0,999) nisu pokazale više Fos ekspresije nego skupina u kućnom kavezu ( Slika 5A). Među grupama s dobrim ugašenjima, lošim ugašenjima, prisjećanjem straha i kućnim kletkama pojavila se značajna razlika u ekspresiji Fos u aCLA (X2 (3) = 8,455, p = 0,036), kao i skupina prisjećanja straha (srednja rangova razlika = 14,50, p = 0,049), ali ni loša (srednja rangova grupa = 10,21, p = 0,373), ni grupa s dobrim rezultatom (srednja rangova grupa = 4,607, p > 0,999) nije pokazala veći ekspresiju Fos, nego grupa u kućnoj kletki ( Slika 5A). Postojala je značajna razlika u ekspresiji aCLA Fos između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i kućnih stanica (X2(3) = 8,455, p = 0,036), tako da je skupina prisjećanja straha (srednja razlika u rangu = 14,50, p = 0,049), ali ni siromašna (srednja razlika u rangu = 10,21, p = 0,373) ni dobra grupa izumiranja (srednja razlika u rangu = 4,607, p > 0,999) nisu pokazale veću ekspresiju Fos od skupine matičnih stanica (Slika .5A) . aCLA 中Fos 表达的良好消退、消退差、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着差异(X2 (3) = 8,455, p = 0,036)，因此恐惧回忆组(srednja razlika ranga = 14,50，p = 0,049，但无论是差，(平均秩差= 10,21，p = 0,373）还是良好灭绝＝(平均秩差= 4,607，p > 0,999）组，都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图5A) . Acla 中 fos 表达 的 消退 、 消退差 、 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 差异 差异 差异 差异 (x2 (3) = 8,455, p = 0,036) ， 因此 恐惧 回忆组 回忆组 回忆组 回忆组 (srednja vrijednost Razlika u rangu = 14,50 ， P = P = P = P = 14. 0,049， 但 无论是 差 平均 秩差 秩差 = 10,21 ， p = 0,373） 良好 灭绝 （平均 秩差 秩差 = 4,607 ， p> 0,999） 组 都 出 比 家庭 笼组 更 多 的 表达 图 图 图 5a) 。 Bila je značajna razlika među grupama s dobrim ugašenjima, lošim ugašenjima, ocjenom straha i kućnom kletkom po ekspresiji Fos u aCLA (X2(3) = 8,455, p = 0,036), stoga je grupa ocjenjivala strah (srednja rangova razlika = 14,50) , p = 0,049), no skupina s lošim (srednja klasa rangova = 10,21, p = 0,373) i s dobrim povećanjem (srednja klasa rangova = 4,607, p > 0,999) pokazala je veću visoku ekspresiju Fos, nego skupina s kućnom kletkom (ris. 5A). Postojala je značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i kućnih stanica u ekspresiji aCLA Fos (X2(3) = 8,455, p = 0,036), dakle skupina prisjećanja straha (srednja razlika u rangu = 14,50), p = 0,049 ), ali skupine s lošim (srednja razlika u rangu = 10,21, p = 0,373) i dobrim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 4,607, p > 0,999) pokazale su veću ekspresiju Fos od skupine matičnih stanica (Slika 5A). .Nije bilo značajne korelacije između globalne ekspresije Fos u (rs = 0,036, p = 0,876) (Slika 5B) ili ekspresije Fos u aferentnim stanicama IL aCLA (rs = -0,282, p = 0,215) i prisjećanja na izumiranje (Slika 5B)..5D), također nije bilo značajne razlike između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i kućnih staničnih grupa u ekspresiji Fos u aCLA IL aferentima (X2(3) = 6,722, p = 0,081) (Slika 5C)..). Zatim, postojala je značajna razlika između skupina s dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem, prisjećanjem straha i kućnim kavezom u ekspresiji Fos u mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) tako da je skupina s dobrim izumiranjem (Mean Rank Diff . = 12,93, p = 0,038), ali ni grupa slabijeg izumiranja (Mean Rank Diff. = 5,143, p > 0,999) ni grupe prisjećanja straha (Mean Rank Diff. = 14,00, p = 0,063) nisu pokazale značajno veću ekspresiju Fos u mCLA. u odnosu na skupinu kućnih kaveza (slika 5E). Zatim, postojala je značajna razlika između skupina s dobrim izumiranjem, lošim izumiranjem, prisjećanjem straha i kućnim kavezom u ekspresiji Fos u mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018) tako da je skupina s dobrim izumiranjem (Mean Rank Diff . = 12,93, p = 0,038), ali ni grupa slabijeg izumiranja (Mean Rank Diff. = 5,143, p > 0,999) ni grupe prisjećanja straha (Mean Rank Diff. = 14,00, p = 0,063) nisu pokazale značajno veću ekspresiju Fos u mCLA. u odnosu na skupinu kućnih kaveza (slika 5E). Zatim je zabilježena značajna razlika između grupa s dobrim ugašenjima, lošim ugašanjima, uspomenama o strahu i kućnoj kletki u ekspresiji Fos u mCLA (X2 (3) = 10,12, p = 0,018), kao i grupa s dobrim ugašenjima (srednja raznica rangov . = 12,93, p = 0,038), ali niti jedna grupa loših učinaka (srednja rangova razlika = 5,143, p > 0,999), ni grupa ocjena straha (srednja rangova grupa = 14,00, p = 0,063) nije pokazala znatno veću. ekspresije Fos u mCLA. Tada je postojala značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, sjećanja na strah i kućnih stanica u ekspresiji mCLA Fos (X2(3) = 10,12, p = 0,018), tako da je dobra skupina izumiranja (srednji rang razlike = 12,93, p = 0,038), ali ni skupine s lošim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 5,143, p > 0,999) ni skupine koje se prisjećaju straha (srednja razlika u rangu = 14,00, p = 0,063) nisu pokazale značajno veću ekspresiju Fos u mCLA.u usporedbi sa skupinom kućnih kaveza (Slika 5E).接下来 ， 在 mcla 中 的 fos 表达 ， 良好 消退组 、 不良 消 退组 、 恐惧 回忆组 家庭 笼组 之间 显着 差异 （x2 （3） = 10,12 ， p = 0,018） ， 良好 （（（（（（ （（（ Prosječna razlika u rangu.= 12,93, p = 0,038)，但在mCLA 中，弱消退（平均秩差= 5,143，p > 0,999）和恐惧回忆组＄(平均秩差= 14,00 ，p = 0,063）均未显示出更多的Fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 = 12,93, p = 0,038) ， 在 在 mcla 中 ， 弱消退 （平均 秩差 秩差 秩差 = 5,143 ， p> 0,999） 和 回忆组 （平均 秩差 = 14,00, p = 0,063) 未 显示 出 更 多 的fos 表达 表达 的 fos 表达 表达 的 fos 表达相对于家庭笼组（图5E）。 Dalje, u ekspresiji Fos u mCLA prikazana je značajna razlika između grupe s dobrim ugasanjem, grupe s lošim ugasanjem, grupe s ocjenom o strahu i grupe s kućnom kletkom (X2(3) = 10,12, p = 0,018), dakle, grupa je dobra ugašenosti (srednja klasa rangova = 12,93, p = 0,038), ali u mCLA nema slabih poremećaja (srednja klasa rangova = 5,143, p > 0,999), niti skupina ocjena straha (srednja klasa rangova = 14,00, p = 0,999) = 0,063) pokazao je najbolji izražaj Mnogo Fos u usporedbi s grupom s kućnom kletkom (Risunok 5E). Nadalje, postojala je značajna razlika u ekspresiji Fos u mCLA između skupine s dobrim izumiranjem, skupine s lošim izumiranjem, skupine s povratnom spregom straha i skupine kućnih stanica (X2(3) = 10,12, p = 0,018), dakle, dobra izumiranje (srednja razlika u rangu = 12,93, p = 0,038), ali u mCLA ni slabo izumiranje (srednja razlika u rangu = 5,143, p > 0,999) ni grupa prisjećanja straha (srednja razlika u rangu = 14,00, p = 0,999) = 0,063) nisu pokazale bolje Ekspresija Multi Fos u usporedbi sa skupinom matičnih stanica (Slika 5E).Međutim, globalna ekspresija Fos u mCLA (rs = 0,321, p = 0,156) (Slika 5F) ili u aferentnim IL mCLA stanicama (rs = -0,121, p = 0,602) i prisjećanje na izumiranje (Slika 5H), nema značajne razlike između skupine s dobrim izumiranjem, slabim izumiranjem, prisjećanjem straha i matičnom stanicom za ekspresiju Fos u aferentnim stanicama IL mCLA (X2(3)=4,923, p=0,178) (Slika 5G).
Fos aktivnost je bila povišena u srednjem klaustrumu kod štakora s dobrim pamćenjem izumiranja.(A) Grupa koja se prisjeća straha, ali ne i druge grupe, pokazala je povećanu aktivnost Fos u usporedbi sa grupom kućnih stanica u aCLA.(B) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u aCLA i sjećanja na izumiranje.(C) Fos ekspresija u IL aferentnim aCLA stanicama nije se značajno razlikovala između skupina.(D) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u IL aferentima i sjećanja na izumiranje u aCLA.(E) Dobro izumrla skupina, ali ne i druge skupine, pokazala je povećanu aktivnost Fos u mCLA u usporedbi sa skupinom matičnih stanica.(F) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i sjećanja na izumiranje u mCLA.(G) Fos ekspresija u IL mCLA aferentnim stanicama nije se značajno razlikovala između skupina.(H) Nije bilo značajne korelacije između Fos ekspresije u IL aferentima i sjećanja na izumiranje u mCLA.Trake pogrešaka predstavljaju standardnu ​​devijaciju srednje vrijednosti. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05.
Zatim je analizirana globalna i IL projekcija specifična Fos aktivnost u mBLA i pBLA u svim skupinama štakora.Nije bilo značajne razlike između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i kućnih stanica u ekspresiji Fos u mBLA (X2(3)=0,944, p=0,815) (Slika 6A).Također nije bilo značajne razlike između skupina s dobrom regresijom, slabom regresijom, prisjećanjem straha i ekspresijom Fos u matičnim stanicama u aferentnim stanicama IL mBLA (X2(3)=0,518, p=0,915) (Slika 6C).Osim toga, nije bilo značajne korelacije između globalne ekspresije Fos u mBLA (rs = 0,126, p = 0,588) (Slika 6B) i ekspresije Fos u aferentnim stanicama IL mBLA (rs = 0,200, p = 0,385) (rs = 0,200, p = 0,385).p = 0,385).Slika 6D) i opoziv izumiranja.Također nije bilo značajne razlike u dobrom izumiranju, lošem izumiranju, pamćenju straha i grupama kućnih stanica u ekspresiji Fos u pBLA (X2(3) = 4,246, p = 0,236) (Slika 6E), a također nije bilo značajne razlike u pBLA Dobro.izumiranje, loše izumiranje, prisjećanje straha i kućne stanične grupe u ekspresiji Fos u IL aferentnim stanicama (X2(3)=1,954, p=0,582) (Slika 6G).Konačno, globalna ekspresija Fos u pBLA (rs = 0,070, p = 0,762) (Slika 6F) i ekspresija Fos u aferentnim stanicama pBLA IL (rs = 0,122, p = 0,597) i opoziv izumiranja (Slika 6H).
Individualne razlike u reprodukciji izumiranja nisu preslikane na razlike u ekspresiji Fos u bazolateralnoj amigdali.(A) Nije bilo značajnih međugrupnih razlika u ekspresiji Fos u mBLA.(B) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i sjećanja na izumiranje u mBLA.(C) Fos ekspresija u IL mBLA aferentnim stanicama nije se značajno razlikovala između skupina.(D) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u aferentnim stanicama IL i sjećanja na izumiranje u mBLA.(E) Nije bilo značajnih međugrupnih razlika u ekspresiji Fos u pBLA.(F) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i sjećanja na izumiranje u pBLA.(G) Fos ekspresija u aferentnim IL pBLA stanicama nije se značajno razlikovala između skupina.(H) Nije bilo značajne korelacije između Fos ekspresije u IL aferentnim stanicama i opoziva izumiranja u pBLA.Trake pogrešaka predstavljaju standardnu ​​devijaciju srednje vrijednosti.
Konačno, globalna i IL projekcija specifična Fos aktivnost analizirana je u mvHPC i pvHPC kod svih štakora. Postojala je značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i kućnih kaveznih skupina u ekspresiji Fos u mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) tako da dobro izumiranje (srednja razlika ranga = 13,29 , p = 0,031), ali ni grupe slabijeg izumiranja (srednja razlika u rangu = 6,857, p > 0,999) ni prisjećanje straha (srednja razlika u rangu = 8,000, p = 0,864) nisu pokazale veću ekspresiju Fos-a od grupe u kućnom kavezu (Sl. 7A). Postojala je značajna razlika između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i kućnih kaveznih skupina u ekspresiji Fos u mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045) tako da dobro izumiranje (srednja razlika ranga = 13,29 , p = 0,031), ali ni grupe slabijeg izumiranja (srednja razlika u rangu = 6,857, p > 0,999) ni prisjećanje straha (srednja razlika u rangu = 8,000, p = 0,864) nisu pokazale veću ekspresiju Fos-a od grupe u kućnom kavezu (Sl. 7A). Među grupama s dobrim ugašanjima, lošim ugašanjima, ocjenom straha i kućnim ćelijama zabilježena je značajna razlika u ekspresiji Fos u mvHPC (X2 (3) = 8,056, p = 0,045), kao i dobro ugašavanje (srednja rangovana raznica = 13,29) , p = 0,031), ali ni u grupi s lošim ugasanijem (srednja rangova grupa = 6,857, p > 0,999), ni u skupini s ocjenom straha (srednja rangova grupa = 8,000, p = 0,864) ekspresija Fos bila je veća nego u grupi s domaćom kletkom (ris. 7A). Postojala je značajna razlika u ekspresiji mvHPC Fos između skupina s dobrim izumiranjem, slabim izumiranjem, prisjećanjem straha i kućnim stanicama (X2(3) = 8,056, p = 0,045), dakle dobrom izumiranjem (srednja razlika u rangu = 13,29), p = 0,031), ali ni u skupini s lošim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 6,857, p > 0,999) niti u skupini koja se prisjeća straha (srednja razlika u rangu = 8,000, p = 0,864) ekspresija Fos nije bila veća nego u matičnoj skupini.stanica (slika 7A). mvHPC 表达的良好消退、不良消退、恐惧回忆和家庭笼组之间存在显着差异＂ (X2 (3) = 8,056, p = 0. 045，因此良好消退（平均秩差= 13,29） ，p = 0,031 ），但无论是弱消退（平均秩差= 6,857，p > 0,999）还是恐惧回忆（平均秩差= 8,000，p = 0,864）组都显示出比家庭笼组更多的Fos 表达（图2）。 mvhpc 中 fos 表达 的 消退 、 不良 消退 恐惧 回忆 和 家庭 笼组 之间 存在 显着 差异 （（x2 (3) = 8. 056, p = 0,045） 良好 （（(平均 秩差 秩差 = 13,29） p = 0,031) ， 无论是 弱消退 （平均 秩差 秩差 = 6,857 ， p> 0,999） 还是 恐惧 （平均 秩差 秩差 = 8,000 ， p = 0,864） 组都 出 家庭 笼组 多 的 fos 表达 图 图。。。。 ）)）)))))))))))))))))) Imala je značajnu razliku između grupa «horošo», «ploho», «prisjećanje straha» i «kućna ćelija» za ekspresiju Fos u mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) i, dakle, dobra regresija (srednja klasa rangova = 13,29), p = 0,031), no grupa sa slabim učinkom (srednja klasa rangova = 6,857, p > 0,999) i spominjanje straha (srednja klasa rangova = 8,000, p = 0,864) pokazala su veći ekspresiju Fos, nego grupa u domašnej kletke (ris. 2). Postojala je značajna razlika između dobrih, loših, prisjećanja straha i kućnih stanica za ekspresiju Fos u mvHPC (X2(3) = 8,056, p = 0,045) i stoga dobra regresija (srednja razlika u rangu = 13,29), p = 0,031), ali skupine sa slabim izumiranjem (srednja razlika u rangu = 6,857, p > 0,999) i sjećanjima na strah (srednja razlika u rangu = 8,000, p = 0,864) pokazale su veću ekspresiju Fos nego skupina u kućnom kavezu (Slika 2).7A).Međutim, nije bilo značajne razlike (X2(3) = 4,893, p = 0,180) (Slika 7C).Osim toga, nije bilo značajne korelacije između globalne ekspresije Fos u mvHPC (rs = -0,233, p = 0,309) (Slika 7B) i ekspresije Fos u aferentnim IL stanicama mvHPC (rs = 0,056, p = 0,810) (Slika 7D).i prijavu nestanka.Nadalje, nije bilo značajne razlike između dobrog izumiranja, lošeg izumiranja, prisjećanja straha i kućnih stanica u ekspresiji Fos u pvHPC (X2(3) = 3,623, p = 0,353) (Slika 7E), a nije bilo značajnih razlika.razlika u dobroj regresiji ekspresije Fos u pvHPC aferentnim IL stanicama, slaboj regresiji, sjećanju na strah i grupama kućnih stanica (X2(3)=3,871, p=0,276) (Slika 7G).Konačno, nije bilo značajne korelacije između pvHPC globalne Fos ekspresije (rs = -0,127, p = 0,584) (Slika 7F) i Fos ekspresije u IL-aferentnim pvHPC stanicama (rs = 0,176, p = 0,447) i prisjećanja na izumiranje (Slika 7F ).7H).
Fos ekspresija je povišena u ventralnom hipokampusu štakora, što ukazuje na dobro odumiranje pamćenja.(A) Dobro izumrla skupina, ali ne i druge skupine, pokazala je povećanu ekspresiju Fos u mvHPC u usporedbi sa skupinom kućnih stanica.(B) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i sjećanja na izumiranje u mvPHC.(C) Fos ekspresija u mvHPC aferentnim IL stanicama nije se značajno razlikovala između skupina.(D) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u IL aferentima i sjećanja na izumiranje u mvHPC.(E) Nije bilo značajnih razlika između skupina u ekspresiji Fos u pvHPC.(F) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos i sjećanja na izumiranje u pvHPC.(G) Fos ekspresija u pVHPC aferentnim IL stanicama nije se značajno razlikovala između skupina.(H) Nije bilo značajne korelacije između ekspresije Fos u IL aferentima i sjećanja na izumiranje u pvHPC.Trake pogrešaka predstavljaju standardnu ​​devijaciju srednje vrijednosti. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *p < 0,05. *r < 0,05. *p < 0,05.Naša primarna analiza za sve regije pokazala je usporedbu na tri razine duž anteroposteriorne osi, iako smo također analizirali svaku regiju koja je kolabirala duž anteroposteriorne osi.Rezultati ovih analiza prikazani su u tablici 1.
Ovdje smo testirali hoće li se individualne razlike u sjećanju na izumiranje odraziti na različite obrasce aferentne aktivnosti u donjem limbičkom korteksu.U tu smo svrhu procijenili Fos aktivnost u IL projekcijama iz paraventrikularnog talamusa, klaustruma, bazolateralnog tonzila i ventralnog hipokampusa nakon ponavljanja izumiranja.U stanicama koje projiciraju IL, pronašli smo veću aktivnost u stražnjoj regiji PVT kod štakora koji su pokazali dobro sjećanje na izumiranje u usporedbi sa štakorima sa slabim izumiranjem.Nije bilo razlika u IL aferentima iz klavikularne jezgre, ventralnog hipokampusa ili bazolateralnog tonzila.Uz stanice koje projiciraju IL, povećana neuralna aktivnost opažena je u odabranim područjima klaustruma štakora i ventralnog hipokampusa s dobrom rezolucijom.Naši rezultati pokazuju da je uspješno pamćenje izumiranja organizirano specifičnim PVT projekcijama na IL i ne-IL ciljane stanice u klaustrumu i ventralnom hipokampusu.
Otkrili smo da je predviđanje PVT IL bilo aktivno kod štakora koji su pokazali dobro prisjećanje izumiranja, što je u skladu s nedavnom studijom koja pokazuje da je PVT potreban za prisjećanje izumiranja.Ova studija nije koristila manipulacije specifične za podregiju, ali je pokazala da su i PVT projekcije na lateralnoj središnjoj amigdali i IL projekcije na PVT potrebne za reprodukciju izumiranja.Naši rezultati pokazuju da bi, uz IL-PVT-CeL lanac, ulazak nakon PVT-a u IL također mogao biti potreban za prigušivanje.Dakle, pokazalo se da su i eferentne i aferentne IL veze uključene u reprodukciju izumiranja.Važan sljedeći korak je utvrditi što uzrokuje pPVT da signalizira reprodukciju izumiranja na razini neuralnog kruga.Uz odnos s IL-om, prethodne studije praćenja duktusa31,32 pokazale su da pPVT prima podatke iz ventralnog periakveduktalnog sivog (vPAG), koji je povezan s učenjem izumiranja33,34,35,36.Iako uloga vPAG-a u opozivu izumiranja nije utvrđena, predviđanje pPVT-a pomoću vPAG-a atraktivan je kandidat zbog njihove gustoće i uključenosti obje regije u generiranje prethodnih dokaza straha od izumiranja.
Još jedan važan aspekt naših PVT rezultata je da su specijalizirani duž svoje anteriorno-posteriorne osi.Zapanjujuće, neuronska aktivnost PVT projekcije u IL korelira sa suprotnim stanjem ponašanja, tako da je aktivnost prije PVT projekcije u IL povezana s prisjećanjem straha, dok je pPVT projekcija aktivna nakon uspješnog gašenja prisjećanja (tj. straha).Ova funkcionalna heterogenost unutar PVT-a nije iznenađujuća s obzirom na prethodni rad [razmotren u 37].Upečatljiv primjer funkcionalne distribucije u PVT-u nedavno se pojavio u studiji koja je karakterizirala svojstva specifičnih tipova stanica u PVT-u.Ova studija pokazuje da se dopaminske stanice koje eksprimiraju DRD2 pretežno eksprimiraju u pPVT, inerviraju korteks prednjih udova i reagiraju na averzivne podražaje.Druga stanična populacija je pretežno izražena u aPVT i označava prijelaz u stanje niskog fiziološkog uzbuđenja i inervira korteks donjih udova.Naši se rezultati teško uklapaju u ovaj obrazac, budući da su aPVT stanice koje projiciraju IL aktivne tijekom prisjećanja straha, dok su pPVT projekcije aktivne i životinje pokazuju niske razine straha.Postoje najmanje dva moguća objašnjenja za prividnu nepodudarnost.Prvo, identificirani tipovi stanica nisu smješteni isključivo na jednom prednje-stražnjem mjestu TVV-a.Stoga, aktivne pPVT stanice koje projiciraju IL u štakora s dobrim pamćenjem izumiranja mogu pripadati klasi stanica za koje je vjerojatnije da će se otkriti u aPVT i signalizirati prijelaz u stanje niskog uzbuđenja.Isto bi moglo vrijediti za stanice koje projiciraju IL u aPVT-u aktiviranom nakon sjećanja na strah.Drugo, prethodne studije praćenja identificirale su prisutnost pPVT-ova koji projiciraju IL3, iako se čini da su neki izvedeni iz stanica koje sadrže DRD2, drugi tipovi stanica mogu se projicirati na IL i aktivirati nakon uspješne reprodukcije gašenja.
Iako je cilj ove studije bio identificirati razlike između štakora koji pokazuju različite fenotipove izumiranja, ti su pokusi također otkrili nove podatke vezane uz mehanizme pamćenja straha.Zanimljivo, pronašli smo povećanu aktivnost Fos na prednjoj CLA kod štakora s pamćenjem straha.
Klavikula je pozicionirana kao središte kortikalne komunikacije i uključena je u procese u rasponu od senzorne integracije do pažnje i spavanja40,41,42,43.Postoje ograničeni dokazi o tome kako je klaustrum uključen u uvjetovanje straha ili izražavanje straha, međutim, ranija su istraživanja pokazala da je kontekstualno izražavanje straha uključeno u Fos aktivnost u klaustrumu.Nedavno je objavljeno da inhibicija projekcija atrezije na entorinalni korteks tijekom kontekstualnog uvjetovanja straha oštećuje formiranje dugoročnog pamćenja, iako njihova potreba za izražavanjem straha nije ispitana.U istoj studiji, povećana aktivacija Fos-a primijećena je kada su životinje bile izložene novom okruženju u usporedbi s miševima koji su bili izloženi poznatom okruženju.Imajući to na umu, CLA aktivacija o kojoj ovdje izvješćujemo može biti posljedica izlaganja novoj kameri tijekom testiranja, a ne straha od samog povlačenja.Kako bi se točnije opisala funkcija brava u obradi straha i situacije, buduće studije trebale bi koristiti ciljanu manipulaciju bravama.
Iako je prethodni rad pokazao da je PVT povezan s izražavanjem sjećanja na strah,45,46,47 nismo uočili nikakvu promjenu u ukupnom izražavanju Fos kod štakora kada su se prisjetili straha 48 sati nakon kondicioniranja.Ova se razlika može objasniti s nekoliko čimbenika, uključujući prethodni rad na testiranju straha od diskretnih znakova u istom kontekstu u kojem se odvijalo uvjetovanje, dok je u našem eksperimentu testiranje obavljeno u novoj prostoriji.Osim toga, naše smo životinje eutanazirali 60 minuta nakon testiranja, dok je prethodni rad koristio vremensku točku od 90 minuta.Naposljetku, u prethodnim studijama test je proveden u prostoriji u kojoj su životinje mogle odgovoriti apetitom, dok su u našem radu štakori testirani bez apetita.Iako ovo dopušta određeni stupanj uvjetovane inhibicije, postoje dokazi da dopuštanje životinjama da inhibiraju pritisak da dobiju hranu dok testiraju boje li se znakova stvara motivacijski sukob (tj. strah nasuprot nagrade), što je ključni stimulirajući faktor.sudjelovanje PVT48, 49. .
Poznato je da je bazolateralna amigdala uključena u stjecanje izumiranja straha50,51 i postoje dokazi da su projekcije BLA na IL također uključene u ovaj proces23.Međutim, nije jasno jesu li BLA i njegove veze uključeni u povratak izumiranja.Slikovne studije23,28 pokazale su povećanu aktivnost BLA kod životinja koje se prisjećaju izblijedjelih sjećanja.Dok naš prethodni rad nije pokazao razliku u aktivaciji BLA između dobrih i loših štakora izumiranja, naši rezultati ovdje sugeriraju da prisjećanje izumiranja općenito ne utječe na BLA ili aktivaciju u predviđanju BLA IL.U skladu s našim nalazima, iako studije manipulacije krugovima sugeriraju da su IL inputi u BLA važni za učenje izumiranja, oni nisu potrebni za prisjećanje izumiranja.Međutim, uloga BLA ne može se potpuno zanemariti jer nedavni dokazi sugeriraju da su određene vrste stanica u BLA potrebne za reprodukciju izumiranja.
Primjetno je da prisjećanje straha nije rezultiralo aktivacijom Fos-a u BLA, budući da su prethodne studije lezija, lijekova i slika uključile ovo područje u izražavanje straha i/ili ponovnu konsolidaciju straha nakon preuzimanja54,55,56,57.Ovdje predstavljeni podaci kombiniraju bazalni i lateralni subnukleus amigdale, a prethodni podaci sugeriraju da izražavanje straha pokreće Fos aktivnost na dorzalnoj strani lateralnog nukleusa.Zasebno smo analizirali temeljne i bočne podatke, ali nije bilo razlike ni u jednom slučaju (podaci nisu prikazani) i oba su područja propala u podacima koje ovdje predstavljamo.Nismo analizirali subregije lateralne amigdale, tako da specifične promjene u ovom području mogu biti maskirane.Druga mogućnost da nema promjena u Fos aktivnosti u BLA je zbog vremena sjećanja na strah u usporedbi s uvjetovanjem.Neki prethodni radovi su pokazali da se doprinos BLA izražavanju straha smanjuje s vremenom nakon uvjetovanja, tako da je izražavanje BLA ovisno 24 sata nakon uvjetovanja, ali neovisno 7 dana (ref. 45, ali vidi 58).dogodio 48 sati nakon treninga, zbog čega nedostatak promjene u Fos aktivnosti u ovoj vremenskoj točki vjerojatno odražava vremenski ovisne promjene u sudjelovanju BLA u izražavanju straha.
Konačno, nalazimo dokaze da je uspješno sjećanje na izumiranje povezano s ventralnim hipokampusom.To je karakteristično za "srednje" vHPC-ove jer isti uzorak nije viđen u stražnjoj regiji.U skladu s prethodnim radom, nismo pronašli promjene u aktivaciji Fos u aferentnim vHPC IL-ovima.Postoje značajni dokazi da je vHPC28,60,61 neophodan za aktualizaciju straha kada se CS dogodi izvan konteksta u kojem dolazi do blijeđenja, te da to barem djelomično ovisi o ulasku vHPC u IL13.Na temelju ovih prethodnih rezultata, očekivali bismo da je slabo blijeđenje povezano s povećanom predviđenom IL aktivnošću vHPC.Međutim, to nije bio slučaj jer nije bilo razlike u aktivnosti Fos u IL-projiciranim retrogradno obilježenim vHPC ili neobilježenim stanicama u vHPC.Ovo sugerira da nemogućnost pamćenja blijeđenja u kontekstu blijeđenja može pokrenuti drugačiji mehanizam od straha od obnove.
Važno je uočiti neka inherentna ograničenja dizajna i analize i kako ona utječu na naše zaključke.Prvo smo podijelili životinje na gornju i donju trećinu, a miševe na "dobre" i "loše" na temelju rezultata prisjećanja izumiranja.To se radi kako bi se izbjegle grupne sheme koje dijele životinje u zasebne skupine iz sredine distribucije ili grupne sheme koje isključuju životinje iz sredine distribucije, kao što je odvajanje medijanom ili usporedba gornje i donje trećine štakora .želimo izbjeći ovu situaciju jer podjela medijana ne odražava varijabilnost ljudskih odgovora na traumu koju pokušavamo modelirati.Osim toga, dok nam usporedba gornje i donje trećine štakora omogućuje usporedbu skupina slične veličine, ovaj pristup zanemaruje životinje u središtu distribucije i ne odražava točno varijabilnost u reakcijama na ozljedu.Iako naša metoda može imati problema s heterogenom varijancom i usporedbom grupa s nejednakom veličinom uzorka, ona bolje bilježi ono što pokušavamo oponašati od alternativnih metoda.
Ovdje prikazani rezultati pomažu nam da bolje razumijemo kako se individualne razlike u sjećanju izumiranja odražavaju na razlike u aktivnosti neuralnog kruga.Naša otkrića mogu biti relevantna za posttraumatski stresni poremećaj, za koji je poznato da je povezan s pretjeranim strahom i nemogućnošću uklanjanja odgovora na strah.Pokazali smo da su razlike u sjećanju izumiranja povezane s razlikama u intrinzičnoj i ekstrinzičnoj neuralnoj aktivnosti projiciranoj na IL.Te su razlike bile raspoređene po različitim regijama duž anteroposteriorne osi, dodatno naglašavajući važnost procjene funkcije mozga na subregionalnoj razini.Nedostaci sadašnje metode uključuju relevantnost studije i fokus na mužjake glodavaca.Buduća bi istraživanja trebala utvrditi neurobiološke mehanizme koji leže u osnovi učenja izumiranja kod ženki glodavaca i koristiti metode za izvođenje uzročnih zaključaka.
Skupovi podataka korišteni i/ili analizirani u ovoj studiji dostupni su od odgovarajućih autora na razuman zahtjev.
Pavlov IP Conditioning: studija fiziološke aktivnosti cerebralnog korteksa.(Oxford University Press, 1927.).
Rothbaum, BO i Davis, M. Primjena načela učenja u liječenju posttraumatskih reakcija. Rothbaum, BO i Davis, M. Primjena načela učenja u liječenju posttraumatskih reakcija.Rotbaum BO i Davis M. Primjena principa učenja u liječenju posttraumatskih reakcija.Rotbaum BO i Davis M. Primjena principa učenja u liječenju posttraumatskih reakcija.instalirati.New York College.znanost.1008(1), 112-121 (2003).
Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Pregled terapije izloženosti: zlatni standard za liječenje PTSP-a. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Pregled terapije izloženosti: zlatni standard za liječenje PTSP-a.Rauch SA, Eftekhari A. i Ruzek DI Pregled terapije izloženosti: zlatni standard liječenja posttraumatskog stresnog poremećaja. Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI 暴露疗法回顾：PTSP 治疗的黄金标准。 Rauch, SA, Eftekhari, A. & Ruzek, JI Pregled terapije izloženosti: zlatni standard za liječenje PTSP-a.Rauch, SA, Eftekhari, A. i Ruzek, DI Pregled terapije izloženosti: zlatni standard liječenja posttraumatskog stresnog poremećaja.J. Rehabilitacija.razvoj ležišta 49, 679–687.https://doi.org/10.1682/jrrd.2011.08.0152 (2012).
Foa, EB Dugotrajna terapija: prošlost, sadašnjost i budućnost.Potiskivanje tjeskobe 28, 1043–1047.https://doi.org/10.1002/da.20907 (2011).
g. Millard i sur.Egzistencijalni i stečeni uzroci gubitka pamćenja u posttraumatskom stresnom poremećaju: rezultati studije blizanaca.J. Psihijatar.spremnik.42(7), 515-520 (2008).
g. Millard i sur.Neurobiološka osnova nemogućnosti prisjećanja blijedih sjećanja u posttraumatskom stresnom poremećaju.biologija.Psihologija.66(12), 1075-1082 (2009).
Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individualne razlike u strahu: izolacija reaktivnosti straha i fenotipovi oporavka od straha. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individualne razlike u strahu: izolacija reaktivnosti straha i fenotipovi oporavka od straha.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. i LeDoux, JE Individualne razlike u strahu: razlikovanje fenotipova reaktivnosti straha i ponovnog uspostavljanja straha. Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE 恐惧的个体差异：隔离恐惧反应和恐惧恢复表型。 Bush, DEA, Sotres-Bayon, F. & LeDoux, JE Individualne razlike u strahu: izolacija reakcije na strah i tablica oporavka od straha.Bush, DEA, Sautre-Baillon, F. i LeDoux, JE Individualne razlike u strahu: izolacija odgovora na strah i fenotip oporavka od straha.J. Trauma.tlak 20(4), 413–422 (2007).
Russo, AS & Parsons, RG. Akustični odgovor na preplašenost kod štakora predviđa interindividualne varijacije u nestanku straha. Russo, AS & Parsons, RG. Akustični odgovor na preplašenost kod štakora predviđa interindividualne varijacije u nestanku straha.Russo, AS i Parsons, RG. Akustični odgovor na trzanje kod štakora predviđa individualne razlike u nestanku straha. Russo, AS & Parsons, RG 大鼠的声学惊吓反应预测恐惧消退的个体差异。 Russo, AS & Parsons, RGRusso, AS i Parsons, RG. Akustični odgovor na trzanje kod štakora predviđa individualne razlike u nestanku straha.Neurobiologija.studija.Memorija.139, 157–164 (2017).
Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Individualna varijabilnost u prisjećanju nestanka straha povezana je s fosforilacijom protein kinaze aktivirane mitogenom u infralimbičkom korteksu. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Individualna varijabilnost u prisjećanju nestanka straha povezana je s fosforilacijom protein kinaze aktivirane mitogenom u infralimbičkom korteksu.Russo, AS, Lee, J. i Parsons, RG Individualna varijabilnost u izumiranju prisjećanja straha povezana je s fosforilacijom protein kinaze aktiviranom mitogenom u infralimbičkom korteksu. Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG 回忆恐惧消退的个体差异与边酸化有关。 Russo, AS, Lee, J. & Parsons, RG Sjećanje na nestajanje straha povezano je s individualnim razlikama u perifernoj fosforizaciji.Russo, AS, Lee, J. i Parsons, RG Individualne razlike u nestanku straha tijekom prisjećanja povezane su s fosforilacijom mitogen-aktiviranih protein kinaza u korteksu donjih udova.Psihofarmakologija 236(7), 2039–2048 (2019).